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645A-白膜层分离及核酸提取自动化方案-(贝克曼）
生物技术的飞速发展，也让生物资源的利用更加精准和充分。人的血液是个巨大的宝库，可以辅助疾病诊断与治疗。随着精准医疗的提出，个体化诊断、CART治疗、单克隆抗体治疗等技术不断成熟普及，血液的利用也越来越广泛，尤其是特定成分的使用。血液经离心分离，从上到下，可以获得血浆、白膜层和红细胞等。其中，白膜层的分离需要专业的技术和熟练的技巧，手工操作缓慢而繁琐。
Beckman Biomek i5自动化工作站可以精准定位、快速分离白膜层，使流程标准化，消除不同技术人员的操作差异，提高白膜层核酸提取的产量和质量，并实现高通量样品处理。
*扫描采血管条形码记录样本信息
*拍照模块对采血管进行拍照
*液面分析系统对红细胞层、血浆层和白膜层进行高度分析
*分析结果上传到Biomek软件
*Biomek软件根据分析系统结果进行液面高度确认
*Biomek软件根据白膜层高度，驱动加样器进行白膜层分离
Biomek i5自动化工作站。该款工作站配置了灵活8通道加样器、1个斜侧抓板机械手、涡旋振荡模块、吸头回放模块以及拍照模块。拍照和采血管架模块可根据需要进行拆卸,拆卸后可增加9个通用板位。分离96个样本的白膜层需要约20min。
白膜层主要包括富含血小板区、富含淋巴细胞区、富含单核细胞区和富含粒细胞区,粘度较大,使用1000ul宽口吸头可以更好地吸取白膜层。
内置转圈吸液模板，最大限度模拟手工吸取白膜层操作,提高分离效率。
磁珠法白膜层核酸提取流程
白膜层核酸提取台面布局举例。96个样本的白膜层核酸提取所需耗材:
(1)2盒100Ou吸头,分别用于吸取试剂、白膜层和废液。
(2)1盒20Oul吸头,用于转移洗脱后核酸。
(3)4个试剂槽,用于放置各种裂解液、洗涤液和洗脱液
(4)2个深孔板,分别作为提取板和废液板。
(5)1个PCR板,用于存放提取后的核酸。
(6)1个磁力架,用于吸附磁珠。
Biomeki5 自动化工作站使用的耗材和试剂品牌开放,用户可根据需要选择国产或进口品牌的耗材和试剂,成本掌握在用户手中。
灵活8通道移液器,每个通道均可独立控制,间距可根据不同孔间距的耗材自动调整,可同时吸取不同体积的液体。
斜侧抓板机械手，实现工作站内及周边耗材的搬运，斜侧夹板属性保证耗材搬运无局限性,充分利用台面空间。
涡旋振荡模块,振速0-180ORPM。模块上带有自动夹板器及感应装置,样品板在被夹板器固定后才进行高速振荡,过程安全可靠。
拍照模块，具备两个高清拍照镜头，可以对不同高度的红细胞层、白膜层、血浆层进行识别及定位，LED灯用于拍照过程的光补偿。
独立孔结构吸头盒,每个吸头都有独立的存放空间,可自动将用过的吸头回放至原吸头盒的原孔中,不会发生气溶胶交叉污染,在实验设计允许的情况可重复使用,节约成本。
Table.1 白膜层核酸提取结果。起始样本为8个白膜层样本各200u利用 GenFind V2 核酸提取试剂盒通过磁珠法进行核酸提取,用Nanodrop检测核酸浓度和纯度。从上表测得的结果可以看出,Biomek工作站提取核酸的浓度、纯度良好。
